En una noche mágica en el Museo de Historia Natural de Nueva York, Larry Daley, el guardia nocturno más genial de la historia, descubre que la magia que da vida a las exposiciones está empezando a desvanecerse. Tras una serie de eventos peculiares y cómicos, se entera de que el secreto que mantiene todo en movimiento reside en un antiguo artefacto que no solo hizo posible la magia, sino que también necesita un “retoque” urgente.

En esta comedia romántica, conocemos a Sam, un escritor en apuros que busca desesperadamente encontrar inspiración para su novela. Su vida da un giro inesperado cuando se enamora de Birdie, una chica encantadora pero un poco impredecible que parece sacada de un sueño. La química entre ellos es innegable, pero hay un pequeño problema: Sam es bastante introvertido y tiene que lidiar con sus propias inseguridades.

Cuando Larry Daley, el ex vigilante del museo de historia natural, se convierte en un exitoso empresario, piensa que sus días de aventuras nocturnas han quedado atrás. Sin embargo, el caos se desata cuando se entera de que su querido museo está a punto de ser cerrado y los valiosos artefactos serán llevados al Smithsonian Institution en Washington D.C. Pero lo que Larry no sabe es que allí, las cosas no son tan tranquilas como parecen.

En una emocionante aventura que mezcla historia con comedia, un hombre común llamado Larry Daley consigue un trabajo como guardia de seguridad nocturno en el Museo de Historia Natural de Nueva York. Al principio, Larry pensando que el trabajo será pan comido, pero pronto descubre que las cosas no son lo que parecen. Cada noche, cuando las luces se apagan, las exposiciones cobran vida gracias a un antiguo hechizo. Desde dinosaurios animatrónicos hasta figuras históricas como Teddy Roosevelt y el faraón Akhmenra, el museo se convierte en un auténtico caos.