Cuando Larry Daley, el ex vigilante del museo de historia natural, se convierte en un exitoso empresario, piensa que sus días de aventuras nocturnas han quedado atrás. Sin embargo, el caos se desata cuando se entera de que su querido museo está a punto de ser cerrado y los valiosos artefactos serán llevados al Smithsonian Institution en Washington D.C. Pero lo que Larry no sabe es que allí, las cosas no son tan tranquilas como parecen.
Al llegar al nuevo museo, Larry descubre que sus amigos de cera, como Teddy Roosevelt y el pequeño dinosaurio Rexy, están en peligro debido a un antiguo artefacto que ha despertado a una facción de figuras históricas que están listas para hacer el mal. Con la ayuda de nuevos y excéntricos amigos, como Amelia Earhart y el famoso artista Aladino, Larry debe luchar contra el malvado Kahmunrah, un faraón que busca dominar el mundo gracias a su poder sobrenatural.
La noche se transforma en una frenética batalla entre la historia y la modernidad, llena de acción, humor y referencias culturales. Larry debe encontrar la manera de restaurar el equilibrio en el museo y salvar a sus amigos, mientras aprende valiosas lecciones sobre la amistad, el coraje y la importancia de valorar nuestras raíces. Todo esto ocurre en un escenario espectacular que combina la riqueza cultural de la historia con la diversión de las aventuras nocturnas. ¿Podrá Larry, una vez más, salvar el día antes de que amanezca?